精子保存：生殖中心的历史

精子保存：人类生殖中心同时面向健康人群和男性不育患者两个群体，应当承担男性生殖遗传资源的保存、开发和利用的研究任务。

生殖中心的历史

1776年

意大利著名生物学Spallanzani发现冰雪保存的精子经复温处理能有部分精子存活。

1886年

Mouteyazza发现在低于-15℃时人类精子能够生存，并首次提出了“生殖中心”的概念。

1949年

Polge等发现甘油具有良好的细胞保存保护特性,使这一设想成为可能。

1954年

Bunge和Sherman报道采用保存于干冰中(-78℃)的人类精子解冻后人工授精获得成功。

1963年

Sherman优化了精液的保存方法，将精液保存储存于液氮(-196℃)获得理想效果，至此，人类生殖中心技术平台基本形成。

1973年

10年间全世界约有1000例用精子保存液人工授精出生的婴儿，人类生殖中心已发展成为常规的临床服务机构。

1981年

原湖南医学院（现中南大学）卢光琇等建立了我国第一家人类生殖中心。

1986年

原国家计划生育委员会科学技术研究所（现国家卫生和计育生委员会科学技术研究所）陈振文承担了国家计生委重点项目“人类精子超低温保存技术的研究和人类生殖中心的建立”，并在WHO的培训和资助下建立了人类生殖中心，其目的在于开展生殖保险，为输精管绝育无偿给予的人解除后顾之忧。此外，青岛、山东、上海等地也相继建立了人类生殖中心, 并将人类生殖中心的精液用于免费精子人工授精。

2001年

原卫生部（现国家卫生和计划生育委员会）颁布《人类辅助生殖技术管理办法》和《人类生殖中心管理办法》，同年5月14日以卫科教发〔2001〕143号发布了《人类辅助生殖技术规范》、《人类生殖中心基本标准》、《人类生殖中心技术规范》和《实施人类辅助生殖技术的伦理原则》。

精子保存

精子保存是人类生殖中心的核心技术内容。

成功的精子保存要求在解冻后保持精子结构和功能的完整性。为了保证正常的体内、体内授精能力，精子的细胞器必须在保存和解冻过程中得到保护，特别是顶体、鞭毛和中段等结构。

然而，这些细胞器对保存损伤（例如渗透压）的敏感性是不同的。有时候，当精子活动率得到很好保护时，或许顶体的完整性却受到了严重的损伤。因此，设置理想的保存解冻流程在某种程度上是一门平衡的艺术。

目前待解决的问题：如何提高保存技术，进一步减少保存对精子的损伤，提高精子保存复苏率？

1、对精子活动能力的影响

保存可导致精子运动能力受损，实验结果显示，保存后精子的活动率会下降。不同样本、不同保存方法，其保存复苏率不同。

Oberoi等(2014)证实正常精液保存解冻后，精子的活动率会从86%下降到63%。Araki等(2015)采用微囊单精子保存，解冻后保存复苏率在78%左右。Stein等(2015)采用保存环保存严重少弱精子症精子（每环10~20个精子），93%的样本在解冻后至少能找到一个活动精子。Saeednia等(2015)采用正常精液精子进行保存，解冻后的保存复苏率为82%。

2、顶体损伤

保存可导致精子顶体的损伤，顶体损伤程度直接影响精子保存子的受精能力。保存后部分精子会出现顶体肿胀及破损。顶体损伤主要发生于解冻时，严重时可致精子死亡。与新鲜精子相比，精子保存子获能及顶体反应提前。

3、精子质膜损伤

保存和解冻过程可导致精子质膜受损，进而损害精子的运动能力。膜损伤的程度可以通过测定细胞膜不饱和脂肪酸的脂类过氧化值(lipid peroxidation，LPO)确定。

4、DNA损伤

保存和解冻过程可引起精子DNA损伤。

Spano等(1999)使用吖啶橙对精子头进行DNA染色，发现保存后精子头荧光强度下降，表明精子DNA的完整性受损。Chohan等(2004)进一步证实上述结果，同时发现不同个体精子DNA在保存后的损伤程度不同，因个体差异，部分个体的精子DNA更易因保存受损。

有研究报道，当DNA受损的精子超过30％时精子无法正常受精，因此，Chohan等(2004)建议在使用精子保存液进行人工授精前应检测精子DNA的损害程度。

人类生殖中心（human sperm bank）是利用超低温保存等技术，采集、检测、保存和外供人类精子用于治疗不育症、提供生殖保险，并进行相关研究的机构。“人类生殖中心”概念的提出历史久远。