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从促卵开始,到后期试管婴儿助孕的各个环节,所有患者使用的试剂耗材都是一次性的,且都是提前根据患者夫妻双方的名单进行准备并标注夫妻双方相关信息,而且促卵、处理精液、精卵受精、胚胎观察、胚胎移植及胚胎冷冻保存等所有环节在操作过程中都是实行双人核对制度来确保实验室卵子、精子和胚胎的准确无误。促卵后患者会出现不舒服症状,请促卵后在医院休息2个小时左右,并等待卵子和精子处理结果,如若存在男方精子质量问题,可改卵胞浆内单精子注射方案助孕。部分患者促卵后有不舒服,如阴道出血量增多、腹痛、腹胀加剧、恶心、尿量减少、体重和腹围增加等症状,要及时就诊。向“获卵数=窦卵泡数=胚胎数之间的关系”卵泡数和卵子数不是一个概念,就好像花生壳和花生米之间的关系,部分花生壳里面没有花生米,所以二者不能划等号。试管婴儿助孕过程中的促排阶段通过超声检查会发现多个卵泡,但是在后期会发现促卵或获卵数却少于超声提示的卵泡数量,有时候也会有个别患者获卵数多于超声提示的卵泡数量,其实主要原因在于在打了破卵针后,个人体质差异和对破卵针的敏感度不同,会造成部分患者成熟卵子的数量减少,导致实际获卵数少于超声提示的卵泡数量,而部分患者卵子成熟数量却增加,可能获得的卵子数量要高于超声提示的卵泡数量。另外,部分年龄大,或者卵巢功能较差的患者,也可能存在空卵泡的情况,这就类似空壳的花生,有卵泡没有卵子,因此,这种情况促卵时得到的卵子数量要少于超声监测到的卵泡数。此外,如果卵子外面包裹的那一层透明带存在异常情况,或者精子头部的顶体酶存在功能异常等,也会导致精子无法穿过透明带进入卵子,无法实现精卵结合和受精。即使有卵子发生受精,但是对于质量差的受精卵也可能无法发育到第3天的卵裂期阶段,或者第5天的囊胚阶段。因此,培养的胚胎数量一般是少于或者等于获卵数。
获能伴随着质膜重组、离子通道的调节、胆固醇的流失以及许多蛋白磷酸化状态的改变,获能同时受到内在和外在因子的调节,其中胆固醇、HCO3-、Ca2+以及蛋白磷酸化在精子获能过程中发挥着重要作用。
(1)质膜上的胆固醇流失:获能精子细胞膜表面胆固醇外流,导致胆固醇/磷脂的比例下降及膜流动性升高,膜表面蛋白质重组,使质膜离子通道发生改变,影响细胞内外离子的分布,精子细胞体积也可发生改变。体外诱导胆固醇流失的物质主要有:白蛋白、β-环糊精、高密度脂蛋白。
(2)离子浓度改变:在获能过程中蛋白磷酸化及蛋白激酶活性发生变化,HCO3-浓度增加,胞内Ca2+、pH及cAMP浓度增加。Ca2+通过浓度和分布的变化调节精子,射精之后,精液中的Ca2+和HCO3-迅速通过钙离子通道进入精子,Na+/HCO3-通过协同运输进入精子。Ca2+和HCO3-是精子获能过程的第二信使,Ca2+和HCO3-的流入激活了精子的信号级联反应。
(3)蛋白磷酸化及信号途径:激活精子发生顶体反应前,在女性生殖道内历经了一系列的生化的修饰过程和信号激活。Ca2+和HCO3-激活的信号级联反应包括:①腺苷酸环化酶的激活及cAMP的形成;②蛋白激酶A(PKA)或其他蛋白激酶的激活;③蛋白酪氨酸磷酸化:蛋白酪氨酸磷酸化是精子获能后期的标志性变化。所有这些变化最终使精子获得受精的能力。