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揭秘胚胎的“冷冻”“解冻”及“破壳”，目前胚胎冷冻基本都是采用玻璃化冷冻法。玻璃化冷冻是指在快速冷冻过程中冷冻保护剂由液态直接冻结为无结构的、极其黏稠的玻璃状态或无冰晶结构的固态，这种玻璃状态能保持其溶液状态的分子和离子分布，从而保持胚胎细微结构的完整性。且在冷冻过程中有一定的冷冻保护剂对胚胎进行保护，后期胚胎将一直在-196℃的液氮中冻存。在这种情况下，细胞几乎是停止一切代谢活动，因此，胚胎基本是没有损伤的。除了胚胎外，目前还有精子和卵子的冷冻，但是相对而言，**后的受精能力要比新鲜卵子稍差。精子、卵子和胚胎的解冻也是在解冻保护液中进行的，有着解冻保护剂的保护作用，精子、卵子和胚胎在解冻过程中的损伤会降到最低。在卵子和胚胎的外层会包裹一层由糖蛋白结构组成的透明带，该结构在胚胎体外培养过程中会逐渐变脆，失去弹性，会影响胚胎的孵出和进一步的着床。因此，需通过化学、机械或激光的方法对胚胎透明带进行切薄、打孔，甚至完整切除，以帮助胚胎从透明带内孵出，这就是辅助孵化技术。目前激光法是最为常用的胚胎孵化方式，可以改善女性年龄≥38岁、基础FSH水平增高、卵子透明带厚度超过17μm、胚胎出现50%以上的碎片、反复移植失败以及冷冻胚胎复苏后移植者的胚胎移植成功率。
同种免疫抗体主要指封闭抗体缺乏和NK细胞数量及活性升高两种情况。对于封闭抗体阳性目前研究提示淋巴细胞免疫治疗或者静脉注射丙种球蛋白可明显改善有复发性流产史患者的妊娠结局，但尚有争议。生殖道微生物感染导致的胎停目前的研究认为，生殖道微生物感染是导致孕晚期复发性流产和早产的重要因素，因此，对于存在上述情况的患者建议孕前对生殖道分泌物进行细菌性阴道病、支原体、衣原体等的筛查。对于筛查后确诊为生殖道微生物感染的患者，建议孕前治疗，治疗好之后再进行备孕和受孕，以减少不必要的孕期用药。目前，对于支原体感染是否需要治疗尚存争议。子宫畸形和宫腔问题导致的胎停常见子宫畸形有始基子宫、鞍状子宫（弓形子宫）、双角子宫、单角子宫以及双子宫等，除始基子宫外，其他子宫畸形可引起早期流产的概率为20%。而对于始基子宫，则通常无法助孕。除子宫畸形外，子宫肌瘤、子宫内膜息肉、子宫内膜粘连及子宫内膜异位症等都有导致胚胎停止发育的可能性。而宫颈功能不全则会引起患者孕中晚期的流产。
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且在43岁前相对不受年龄影响。当进行4个周期的米芬治疗时，每个周期的妊娠率是基本恒定的，因此除了43岁以上患者和精液质量很差时，所有患者的治疗都应至少达到这一时限。对于30岁以上排卵障碍患者来讲，4~6个周期的累积妊娠率达到65%，**IUI的妊娠率达到75%，当然要除外子宫内膜异位症和输卵管疾病。三胞胎及更多胞胎与≥12mm卵泡数量和年龄有关。这些情况可以通过监测排卵前卵泡并将约占5％的有6个以上卵泡发育的周期取消而减少。
临床实践点
■克罗米芬用来对有明显的雌激素产生证据的WHO II型月经紊乱和无排卵妇女诱发排卵和提高黄体功能不全患者的孕酮水平。
■临床安全使用克罗米芬的基本要求是可以进行超声监测。在进行第一个克罗米芬周期前应进行盆腔超声以除外卵巢囊肿和排卵并确定排卵前卵泡的数量和内膜厚度。
■月经规律的女性应在周期第三天开始使用克罗米芬以使雌激素对内膜和宫颈黏液的作用最小化。那些月经周期在60~180天的月经不规律或闭经的女性，可以注射100mg黄体酮诱发月经，然后在第5~7天开始。
■妊娠和多胎妊娠情况与患者排卵前卵泡数量、患者年龄以及根据之前妊娠情况所决定的遗传生育力有关。
■量比起尺寸的卵泡数量能更准确地预测患者的多胎妊娠结果。
■克罗米芬和促性腺激素治疗周期中都应进行排卵前的超声波检查以确定多胎妊娠的风险性，必须按顺序计数所有卵泡。
■当因出现过量卵泡决定取消治疗周期时，应考虑患者年龄。
■可以通过以下步骤减少由排卵诱导所引起的高危多胎妊娠结果：
1．在转为使用促性腺激素治疗前，使用四到六个周期的克罗米芬治疗。
2．在增加促性腺激素剂量前，使用最低剂量促性腺激素三到六个周期以至少排出一个卵子。
3．当出现三个或三个以上尺寸大排卵前卵泡时，取消克罗米芬和促性腺激素治疗周期。
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