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AO染色的显微镜分析法,采用酸化固定剂使细胞核变性后用荧光显微镜观察,而不再需要流式细胞仪,当然,AO染色后是可以联合流式细胞仪进行分析的。有研究显示正常生育力男性和不育男性精子AO染色结果具有显著性差异。反映男性自然生育力的正常染色质百分率的"分界值"为80%~50%(绿色荧光)。如果精子含有过多的单链DNA( ssDNA ),检测时仅有较少量绿色荧光(<50%),则会对常规IVF受精产生不利影响。但是与ICSI的妊娠率和活产率没有关联,不含有单链DNA精子的患者,其妊娠率最高。甲苯胺蓝是另一个用于染色质正染和异染的碱性核染料,它能够大量地掺入到致密染色质中,属于针对DNA结构和包装敏感的结构探针。具有完整染色质的精子头部能够染成淡蓝色。核异常的精子(头部染成紫色的精子)与AO染色方法中头部染成橘黄色精子在计数结果上是一致的。
(一)产生部位及运输
神经细胞在下丘脑弓状核合成并分,转运至中隆,直接通过垂体门脉系统输送到腺垂体,或通过脑室膜细胞持续释放入第三脑室。量最多的部位是在下丘脑核团的正中隆起弓状核。弓状核对调节脉冲式释放起重要作用。性激素可能通过刺激弓状核神经元突触联系反馈调节释放。弓状核中的神经可能是联系能量营养与生殖功能的“桥梁”,从而协调生殖与代谢的稳定。以LH释放激素为主,促使脑下垂体前叶释放大量的促黄体生成素。及较少的卵泡刺激素,故也称促黄体生成素释放激素。
(二)分泌特点
间歇而规律的脉冲式分泌,此由弓状核内部固有的节律决定。泌量甚小且主要通过门脉系统进入垂体前叶,外周血中含量甚微,不易测出。泌神经元与其他神经元交互连接,因此多种神经递质、激素及生长因子可交互作用并调节释放半衰期钟,由半衰期短暂并且迅速被周围循环所稀释,血液内的冲频率泌基本一致,常用测定血LH浓度变化以间接判断释放脉冲的频度与幅度。由于传递有生物效应的仅限于垂体门脉系统,对生殖周期的控制就不断释放,并且需有精确的节律与幅度。
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