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虽然彗星试验在原理上比较简单,但是将该方法应用于精子的检查并不是那么容易,因为利用凝胶电泳技术检测DNA损伤的彗星实验。在DNA提取并电泳后,损伤的DNA "像一个"彗星"。显微视野下的动态视频图像转移到计算机后,可以利用专门的软件来分析DNA碎裂的水平。其中用于评价的一个指数为尾距(彗尾长度(tail length , TL)和彗尾DNA百分含量的乘积彗尾密度(tail density , TD ))。尾距可以分为三个水平,即:轻度、中度和重度,分析结果分别给出三者的百分比打开高度致密的精子核,只有这样在电冰时DNA才能释放出来。这就需要去垢剂、酶(RNase和(或)蛋白酶K ),和(或)二硫键还原剂等高效的化学试剂的处理,这样才能导致DNA的断裂。此外,精子DNA的可染性是动态的,随着精子DNA的打开以及与其交联蛋白(鱼精蛋白)的降解和去除,精子DNA染色性逐渐增加。因此,直接比较留在精子(彗星)头部和运动到彗尾中DNA的量比较困难。

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在生殖门诊中,常会遇到患者问“我和她都是不孕患者,为什么治疗方案大不相同呢?”“我可不可以用我朋友前次促排用的方案?”促排卵方案的选择是目前决定做试管婴儿的患者最为关注的话题。其实每个方案的选择主要依据患者的年龄、卵巢储备功能、是否存在生殖相关疾病(如子宫内膜异位症、子宫腺肌症等)、BMI、AMH、基础FSH/LH、基础E2、双侧卵巢窦卵泡数目、既往促排卵治疗卵巢反应性及盆腔卵巢手术史等来综合评估卵巢储备功能是否正常,从而选择合适的促排卵方案。目前常用的促排卵方案有长方案、短方案、拮抗剂方案、超短方案、超长方案、黄体期促排方案及自然周期方案等。长方案:又称黄体中期长方案,是目前使用较多、效果较好、成功率也比较高的经典促排方案。长方案主要适合年龄较小,且卵巢储备功能正常者。该方案是从患者月经周期的第21天或排卵后7天开始使用垂体降调节的药物进行降调节,在进行14天的降调节后,结合超声检查以及FSH、LH、E2等激素水平评估降调效果,当达到降调节标准时,再使用药物进行促排卵。其中促排卵药物的起始剂量主要根据患者的双侧窦卵泡数目和患者的体重进行计算,开始每日注射促性腺激素(Gn),后期根据E2的水平调整用药,当有2个卵泡直径达18mm、3个卵泡直径达17mm或4个卵泡直径达16mm时停用促性腺激素,并于当晚注射hCG 5000~10000U,34~38小时后促卵。然而,卵泡达到多大或达到什么比例可以促卵,目前并没有定论,临床医生根据以往的经验和患者情况确定合适的促卵时机。如患者本身无过度刺激反应且激素水平也正常,可于促卵后3天或者促卵后5天进行卵裂期胚胎或者囊胚的移植。移植后进行黄体支持等。


如果经直肠超声检查发现射精管的梗阻是继发于纤维化或钙化,或者是靠近表面的中线囊肿,则建议进行经尿道切除或射精管开窗术。手术方式可因病变的不同而不同,但都会涉及射精管末段的切除术、囊肿的开窗术或两者联合,如果没有引导方式确定射精管,准确确定切除深度和定位引起梗阻的病变并不容易。而且,理论上直肠壁、外括约肌和膀胱颈的损伤较为常见,因为这些不育症男性的前列腺体积很小。在TURED中进行经直肠超声可监测手术切除深度,防止并发症,并观察手术效果。采用染色剂(在膀胱镜检查时)或采用染色剂和超声增强造影剂的混合物(在经直肠超声中)注射人精囊,然后使用经直肠超声确定射精管经直肠超声也可应用于治疗性穿刺以减小梗阻性囊肿的大小,这种方法适用于不能解决的深处囊肿,是一种简单且相对无创的囊肿减小方式,但常不能根治,囊液可再次蓄积。


25年以来,世界卫生组织(WHO)已经致力于提供评估一份精液标本生育力潜能的标准化方法。这些标准主要关于一些可以测量的参数,如:精液的物理特征,精子或白细胞等细胞内容物的计数,精子形态和运动能力的分级,检查精子和精浆或排卵期宫颈分泌物间的免疫反应。这些标准逐渐得到广泛接受,并通过男科学实验室的资格认证等质量控制计划得到加强。第一版《男科学实验室手册》于1981年出版,它是此前8年间临床经验和研究的顶峰之作。在后续的版本中,手册在评价精液参数时采用了严格标准,对代表男性正常生育力的参考值进行了修正。标准的成功制定建立在近年来临床和实验工作中大量的关注点之上,这些关注集中在如何对精子质量更细致的评价。


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