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AO染色的显微镜分析法,采用酸化固定剂使细胞核变性后用荧光显微镜观察,而不再需要流式细胞仪,当然,AO染色后是可以联合流式细胞仪进行分析的。有研究显示正常生育力男性和不育男性精子AO染色结果具有显著性差异。反映男性自然生育力的正常染色质百分率的"分界值"为80%~50%(绿色荧光)。如果精子含有过多的单链DNA( ssDNA ),检测时仅有较少量绿色荧光(<50%),则会对常规IVF受精产生不利影响。但是与ICSI的妊娠率和活产率没有关联,不含有单链DNA精子的患者,其妊娠率最高。甲苯胺蓝是另一个用于染色质正染和异染的碱性核染料,它能够大量地掺入到致密染色质中,属于针对DNA结构和包装敏感的结构探针。具有完整染色质的精子头部能够染成淡蓝色。核异常的精子(头部染成紫色的精子)与AO染色方法中头部染成橘黄色精子在计数结果上是一致的。


优点:

1·能检测所有的染色体数目异常和大片段的染色体结构异常。

2·是目前胎儿染色体疾病产前诊断的“金标准”。

局限性:

1·一般情况下,穿刺术是比较安全的,但仍存在个别穿刺失败,引起流产、感染、羊水渗漏的风险,“羊穿”的总体胎儿流失率大约为0.5%。

2·细胞培养存在个体差异,不能确保100%成功。

3·染色体检测对于染色体微小结构改变、单基因遗传病、多基因遗传病、环境和药物导致的胎儿宫内发育异常、低比例嵌合以及母体污染不能完全排除。

羊穿”适应证:母体年龄≥35岁;产前筛查提示胎儿染色体异常高风险;既往有胎儿染色体异常的不良孕产史;产前检查怀疑胎儿患染色体病的孕妇;夫妇一方为染色体异常携带者;孕妇可能为某种X连锁遗传病基因携带者;曾有不良孕产史或特殊致畸因子接触史者。近些年有人主张将ICSI(胞浆内单精子注射)也列入“羊穿”指征。

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