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获能伴随着质膜重组、离子通道的调节、胆固醇的流失以及许多蛋白磷酸化状态的改变,获能同时受到内在和外在因子的调节,其中胆固醇、HCO3-、Ca2+以及蛋白磷酸化在精子获能过程中发挥着重要作用。
(1)质膜上的胆固醇流失:获能精子细胞膜表面胆固醇外流,导致胆固醇/磷脂的比例下降及膜流动性升高,膜表面蛋白质重组,使质膜离子通道发生改变,影响细胞内外离子的分布,精子细胞体积也可发生改变。体外诱导胆固醇流失的物质主要有:白蛋白、β-环糊精、高密度脂蛋白。
(2)离子浓度改变:在获能过程中蛋白磷酸化及蛋白激酶活性发生变化,HCO3-浓度增加,胞内Ca2+、pH及cAMP浓度增加。Ca2+通过浓度和分布的变化调节精子,射精之后,精液中的Ca2+和HCO3-迅速通过钙离子通道进入精子,Na+/HCO3-通过协同运输进入精子。Ca2+和HCO3-是精子获能过程的第二信使,Ca2+和HCO3-的流入激活了精子的信号级联反应。
(3)蛋白磷酸化及信号途径:激活精子发生顶体反应前,在女性生殖道内历经了一系列的生化的修饰过程和信号激活。Ca2+和HCO3-激活的信号级联反应包括:①腺苷酸环化酶的激活及cAMP的形成;②蛋白激酶A(PKA)或其他蛋白激酶的激活;③蛋白酪氨酸磷酸化:蛋白酪氨酸磷酸化是精子获能后期的标志性变化。所有这些变化最终使精子获得受精的能力。
为了对OS进行准确的定量,应当在新鲜样本中检测ROS和抗氧化剂的水平。直接检测方法,如脉冲射解和电子自旋共振谱技术已用于在身体的其他系统中检测OS,但是,精浆体积较少、ROS寿命较短以及必须在新鲜样本中检测导致这直接检测法在生殖系统内无法使用。广泛用于ROS检测的是化学发光检测方法,该方法采用敏感探针,如鲁米诺(luminol)和光泽精(lucige - nin)来定量精子的氧化还原活性。虽然这些探针的敏感性高,但它们也易于受到干扰,白细胞污染就是一个主要的混杂因素。并且该技术有一些缺点,它需要注意采集后的分析时间(小于1个小时)以及精子浓度计数上的要求(>1x10/ml)。此外,精液中ROS的来源无法确定。
这些冠状切面的图像可以显示宫底部子宫内膜和子宫肌层间的关系,显示完整的宫颈管图像和各个角的角度。这使得操作者可以测量纵隔的深度及纵隔顶点与宫颈内口间的距离。另外,三维超声使得我们可以诊断新型的纵隔,如不对称纵隔。而且,三维超声可以区分弓形子宫和小的不完全性纵隔。另外一个主要的优点是,三维超声可以快速储存超声信息供以后分析使用尤其有帮助。储存数据的能力使得需要膨宫的时间。这显然是三维超声的一个主要优势,因为所有的原始超声数据毫无遗漏地都保存在数据库里面,而二维超声只有选择储存时才会储存数据。甚至即使对超声过程进行录像,其发现也会是操作者依赖性的,而且任何不能被清晰记录的观察资料就会丢失。三维超声的多维平面容纳能力允许无限量的平面扫描组成原始数据库,这样可以避免操作者依赖导致的偏差。这一数据库可在患者出院后或手术前的任何时间进行交互式回顾。回顾卷宗时可能会检测到在实时检查时未发现的问题。显然,这不会有因延长检查时间或重复经阴道扫描而给患者带来的不便。将与三维超声联合可以提高两项检查的精确性。三维超声检查的一个缺点是对操作者的培训时间要求较长,尽管这可能随超声经验的增加而减少。而且,由于子宫肌瘤、不规则的内膜线或增厚的内膜层(如在排卵前所看到的)及宫腔容积下降(当存在宫腔粘连时)等导致的影像模糊也是三维超声的局限所在。
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