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说到试管婴儿，相信很多人都不陌生了。由于近些年试管婴儿技术发展突飞猛进，从第一代试管婴儿技术已经更迭到第四代了，给了众多不孕不育的人们迎接新生命的希望。尤其是在国家开始全面放开二胎政策后，越来越多想要二孩却因年龄问题而不得的女性，也逐渐将目光转向试管婴儿。随着越来越多的人开始了解并尝试试管婴儿技术，今天我们就试管婴儿技术的整个过程需要经历的阶段进行一个简单的科普，让大家对它有一个更好的了解。
（1）顶体与顶体酶
顶体是指精子头前部有膜包围的帽状结构，顶体的前部为顶体帽，内含各种水解酶类。顶体内所包含的顶体酶至少有20种以上，其中主要是顶体蛋白酶和透明质酸酶，顶体蛋白酶又叫顶体素，位于顶体内膜上，起初与顶体内膜紧密结合，无生物学活性，为一种顶体素酶原。当大量Ca2+内流时顶体素酶原被激活成为顶体素酶，进而分解透明带；透明质酸酶的作用主要使卵丘细胞分散及透明质酸分解，利于精卵接触。
（2）顶体反应的形态学变化
从形态上可见，精子获能后部分精子接触放射冠，顶体内透明质酸酶释放出来分解卵丘细胞之间的透明质酸等物质，使获能精子能够接触到透明带。精子接触透明带后，精子头部脱去顶体帽外的质膜和顶体外膜，释放出水解酶，这个过程叫顶体反应。通过顶体反应，精子最终和卵子融合。
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色霉素是另外的一种玻片染色技术，可用于检测精子染色质浓集异常。CMA3是与富含GC序列特异性结合的荧光染料，被认为同鱼精蛋白竞争性结合DNA，因而染色的程度与成熟精子中鱼精蛋白的水平相关。总的来说，最常用的评价精子染色质结构的技术为SCSA、AO和TB实验，后两者容易开展，但与前者相比，劳动量大且在观察者间和观察者内部存在变异。精子DNA碎片的直接评估方法这类检测方法中最常用的为原位缺口平移分析末端转脱氧核苷酰酶介导的dUTP缺口标记分析( TUNEL）和单细胞凝胶电泳分析（COMET )，其基本原理。缺口平是使用荧光显微镜检测的一种相对简单的技术，反应体系中加入一定量的生物素标记的单链DNA片段，在DNA聚合酶I的催化下与模板链结合。TUNEL分析采用末端转脱氧核苷酰酶催化的反应，可定量检测双链DNA断裂情况。TUNEL结果可以使用明视场显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪分析。一些报告已经显示人精子DNA断裂碎片的增加可对辅助生殖技术的成功率造成负面影响。这些检测方法均为特异性检测。
虽然该项检测特异性高，但它需要密切关注其严格的评分标准，以保证检测的准确性并减少检验员之间的变异。目前为止，无法自动化操作限制了应用该技术在辅助生殖医学中进行相关研究的数量。精子核DNA损伤的检测已经研发了一些用于评估精子染色质完整性的检测用法，它们评估男性生育力的检测效能正被广泛研究。总的来讲，所有检测方法可以分为三类：①精子染色质结构探针；②精子DNA碎片直接评估；③精子核基质的检测。另外，还有其他一些不常用的方法，如高效液相色谱法。减少DNA扭曲产生的能量。该类型染料与松散DNA的嵌合力较低，与变性的和碎片化的DNA不结合。在这种情况下，将染料结合到DNA磷酸化残基的外部机制和聚合型染料受到青睐（异染性：AO聚合体结合到DNA呈现红色荧光）。20世纪60年代以来就已知碎裂的DNA易于变性。
