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越来越多的证据表明外源性因素在特发性少、弱、畸形精子症的发病机制中具有重要作用。不良生活方式、营养失衡、抽烟、久坐、肥胖等都已经证明可以损伤精子质量。职业和（或）环境毒素暴露也具有关键性作用，如工作环境中可能存在重金属、操作间高温和化学污染等。但是，通过食物、饮水和空气暴露于扰乱激素分泌的因素被认为是过去四五十年世界的一些区域男性精液质量持续减退同时睾丸癌发病率增加的主要原因。人工合成的具有雌激素样作用的物质被称作外源性或假性雌激素，包括杀虫剂（DDT )、多氯联苯、氧化呋喃类、二嚼英、苯二甲酸盐、羟基苯甲酸酯类、乙基雌二醇等。这些制剂很难降解，且在环境中和人体内具有生物累积效应。它们不与性激素结合球蛋白结合，在胎盘内不发生代谢，可以自由进入胎儿体内。鉴于此，外源性雌激素可以损害胎儿的睾丸发育，导致胚胎细胞在生殖上皮内持续存在，这些细胞可以蜕变导致睾丸癌（43:44）并能够阻碍Sertoli细胞分裂和成熟，造成以后罹患少精子症。这些雌激系仔章"物同样能够在FSH水平正常的成年少精子症患者中抑制下丘脑﹣垂体轴的功能。激素干扰物，尤其是杀虫剂。可以导致严重的氧化负载而损伤精子细胞膜和DNA。
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AO染色的显微镜分析法，采用酸化固定剂使细胞核变性后用荧光显微镜观察，而不再需要流式细胞仪，当然，AO染色后是可以联合流式细胞仪进行分析的。有研究显示正常生育力男性和不育男性精子AO染色结果具有显著性差异。反映男性自然生育力的正常染色质百分率的"分界值"为80%~50%（绿色荧光）。如果精子含有过多的单链DNA( ssDNA )，检测时仅有较少量绿色荧光（<50%)，则会对常规IVF受精产生不利影响。但是与ICSI的妊娠率和活产率没有关联，不含有单链DNA精子的患者，其妊娠率最高。甲苯胺蓝是另一个用于染色质正染和异染的碱性核染料，它能够大量地掺入到致密染色质中，属于针对DNA结构和包装敏感的结构探针。具有完整染色质的精子头部能够染成淡蓝色。核异常的精子（头部染成紫色的精子）与AO染色方法中头部染成橘黄色精子在计数结果上是一致的。
