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输精管末端的纤维化和钙化继发于炎症或感染。这些病灶在经直肠超声中常表现为高回声区。经直肠超声可以判断射精管道与钙化灶之间的解剖关系,还能发现射精管末端的扩张,这是存在末端梗阻的直接证据。需要指出的是由过度纤维化造成的梗阻可伴有或不伴有明显的射精管扩张。如果既往没有感染史或手术史,这种情况则提示存在亚临床感染射精管末端梗阻的诊断标准。无精症患者在经直肠超声中发现精囊扩张,其前后径大于15mm或射精管直径超过2.3mm时,高度提示射精管末端梗阻。但在射精管不完全梗阻或精囊、射精管扩张不明显时(即过度纤维化患者),单独依靠经直肠超声则难以确诊。对于此类表现不典型的患者,可通过经直肠精囊穿刺得到确诊。如果穿刺样本在高倍镜下每个视野发现3个或以上的活动精子,则应考虑末端梗阻的诊断。穿刺应于射精两小时后进行,因为正常精囊内此时不含活动精子。
染色质异常包装的两个主要原因为组蛋白﹣鱼精蛋白替换缺陷(如上所述)和染色质碎片。精子DNA碎片在低生育力男性中较为常见。生理和环境应激因素、基因突变以及染色体均能够干扰精子发生中染色质包装这一高度精细化的生物化学过程。这种干扰最终可导致染色质结构的异常,继而影响生育力。应激也能够通过调亡和坏死机制诱导染色质结构异常,从而导致精子染色质碎片。此外,在精子发生过程中如果内源性核酸酶﹣- DNA拓扑异构酶II poII)的切断和结合活性异常也会导致染色质碎片的产生。长形精子细胞中存在高水平的topo II和DNA缺刻。存在反映出需要消除因负性超螺旋导致的DNA链的扭曲,长形精子细胞中负性超螺旋的产生与核小体组蛋白被鱼精蛋白替换及DNA三级结构的修饰有关。
一项综合分析表明,输卵管积水对进行IVF妇女达到妊娠具有不良影响。已证明有输卵管积水的患者(1144个IVF周期)与没有积水的患者(5569个IVF周期)相比临床妊娠率降低一半而流产率增加一倍还要多。另外,一项在斯堪的纳维亚进行的在第一个IVF或胚胎移植周期前进行输卵管切除的随机多中心试验表明,每个被包括在内的输卵管切除组患者的临床妊娠率为36.6%而未干预组为23.9%,随之的活产率分别为28.6%和16.3%。最后,在**周期中,有输卵管积水的患者相对于正常对照组而言,着床率明显下降而流产率和异位妊娠率明显。可能由于积水对胚胎有直接影响也可能是由于子宫培养环境的改变。当前提出的胚胎毒性的发生机制首先是积水由输卵管向子宫腔渗漏。这些液体可能不仅是具胚胎毒性而且可能会改变子宫对胚胎的容受性和着床机制。相对于不进行处理而言,切除病变的输卵管不仅可全面提高妊娠率,还可以降低流产率。率先进行了一项前瞻性研究表明,反复IVF失败的患者切除积水的输卵管后对妊娠率有正面影响。15例有单侧或双侧输卵管积水且有反复IVF失败史的患者在腹腔镜下切除了被累及的输卵管。由于进行输卵管切除要求患者是自愿的,在输卵管切除前的一次移植的妊娠率为零。输卵管切除术后一次移植的妊娠率为25%。术后新鲜周期和冻融周期的妊娠率都有改进。通过在IVF前将输卵管积水切除可以使妊娠率得到改善。一项循证医学综述证实,在IVF前将积水的输卵管在腹腔镜下切除后妊娠几率增加,继续妊娠率和活产率也如此。所有这些资料都表明输卵管积水的腹腔镜下输卵管切除是改善妊娠率的首选。
染色质包装密度苯胺蓝(aniline blue , AB)染色显示DNA包装异常的精子核染色质蛋白更易于同酸性染料结合。精子酸性AB着色(蓝色)增加表明染色质包装松散。同时也提示因过多的组氨酸残留造成和蛋白更易于被碱性基团结合。这种大颗粒的染料无法同正常精子(核蛋白主要为鱼精蛋白成分)中包装致密的染色质结合。酸性AB对精子核蛋白的评价结果与AO实验具有良好的一致性(90),而且其结果所反映的异常染色质精子数量与男性不育之间具有明确的相关性。但是AB﹣染色精子的百分率与其他精液参数之间的关系依然存在争议。其中一个重要的发现就是,苯胺蓝染色显示的染色质浓集水平是IVF结局一个较好的预测指标,但是它不能反映ICSI后的受精潜能、卵裂情况和妊娠率。染色质蛋白与AO实验相似,染色质结构分析(SCSATM )主要对AO染色的绿色荧光(自然的DNA)向红色荧光(变性的或松散的DNA或RNA发生异染性转变进行定量,在原位检测精子核DNA对酸诱导构象转变的易感程度。
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