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AO染色的显微镜分析法,采用酸化固定剂使细胞核变性后用荧光显微镜观察,而不再需要流式细胞仪,当然,AO染色后是可以联合流式细胞仪进行分析的。有研究显示正常生育力男性和不育男性精子AO染色结果具有显著性差异。反映男性自然生育力的正常染色质百分率的"分界值"为80%~50%(绿色荧光)。如果精子含有过多的单链DNA( ssDNA ),检测时仅有较少量绿色荧光(<50%),则会对常规IVF受精产生不利影响。但是与ICSI的妊娠率和活产率没有关联,不含有单链DNA精子的患者,其妊娠率最高。甲苯胺蓝是另一个用于染色质正染和异染的碱性核染料,它能够大量地掺入到致密染色质中,属于针对DNA结构和包装敏感的结构探针。具有完整染色质的精子头部能够染成淡蓝色。核异常的精子(头部染成紫色的精子)与AO染色方法中头部染成橘黄色精子在计数结果上是一致的。
另外,射精是一个复杂的生理过程,精子从“仓库”出来后,还需要经过男性的很多关卡,包括输精管、精囊腺、射精管、尿道、阴茎,这个过程混集了各个地方的分泌物(精液)最后射出。如果长时间不射精,这些分泌物的性状也会改变,变成不利于精子获得能力的物质,从而影响精子在女性生殖道内的向前运动能力,进而影响受精。所以,不管是否有排卵不好,不管是否接受医生的促排治疗,也不管是否夫妻都像牛一样壮,建议月经干净后就可以随意同房,不需要刻意去挑选时间,如果有促排卵治疗需要监测的,只要排卵前后有一次同房就可以了。
鉴于SCSA结果与常规WHO精液参数相比在长时间内不会发生变化,有人主张可将其有效用于男性不育的流行病学研究。对很多实验室而言,运行流式细胞分析费用高昂,而且严格的质量控制意味着精液样本需送到大的中心实验室进行该项检测。SCSA检测与下述DNA损伤检测相比特异性稍差,除了检测精子DNA损伤,它能检测鱼精蛋白替换的程度和鱼精蛋白之间二硫键交联水平。事实上,SCSA数据包括了:①未检测到的、含中等水平和高水平DNA碎片精子的百分率;②高度易于着色精子(含较少鱼精蛋白的未成熟染色质)的百分率;③使用未处理精液分析时精子残骸、细菌和破碎细胞的相对含量。在预测不育时,该方法的低特异性可以作为一个优点,因为它可以检测到一种或多种类型的精子缺陷。
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