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为了对OS进行准确的定量，应当在新鲜样本中检测ROS和抗氧化剂的水平。直接检测方法，如脉冲射解和电子自旋共振谱技术已用于在身体的其他系统中检测OS，但是，精浆体积较少、ROS寿命较短以及必须在新鲜样本中检测导致这直接检测法在生殖系统内无法使用。广泛用于ROS检测的是化学发光检测方法，该方法采用敏感探针，如鲁米诺（luminol）和光泽精（lucige - nin）来定量精子的氧化还原活性。虽然这些探针的敏感性高，但它们也易于受到干扰，白细胞污染就是一个主要的混杂因素。并且该技术有一些缺点，它需要注意采集后的分析时间（小于1个小时）以及精子浓度计数上的要求（>1x10/ml)。此外，精液中ROS的来源无法确定。
