以避免在细胞核内注射的方式定位卵子母细胞，并在每个卵子母细胞中注射一个精子。一旦达到这一目的，卵子母细胞就会返回孵化器。受精后第二天早上，ICSI后十七至十九小时进行评估。
第二代试管婴儿技术ICSI的适应症：
精子完全没有射精(精);
低浓度精子(少);
精子活力低下(弱精症);
精子形态(畸形精子症);
精子通过外科技术检索(例如TESA，TESE);
问题与精子结合和穿透卵子;
抗精子抗体;
以前的失败或受精不良;
不明原因不孕;
精子保存数量有限;
如果胚胎植入前遗传学诊断(PGD)被用来筛选特定遗传疾病的胚胎。
第二代试管婴儿技术~胞浆内精子注射(ICSI)，堪称男性不育症治疗的革命性技术。试管婴儿专家指出，第二代试管婴儿技术ICSI是指用玻璃针(吸管)直接将一个精子注入成熟卵子(卵子母细胞)的细胞质中，从而绕过受精的障碍。第二代试管婴儿技术ICSI是目前显微受精供男性因素不孕的最成功的一种形式。
