胚胎玻璃化保存指将胚胎保存在零下196℃的液氮中,以备日后解冻使用,其可以最大可能保存胚胎活力与质量。保存的具体操作步骤分为3步,首先是将胚胎进行脱水皱缩,避免因为胚胎内水含量太多保存形成冰晶影响质量;然后把含有胚胎的保存液装入载杆;最后将其和载杆一同放入液氮罐中,并封罐保存,保存管理得当可以保存10年以上。
胚胎保存就是将早期胚胎,采用特殊的保护剂和降温措施进行保存,使其在 -196℃的液氮中代谢停止或者减弱到足够小的程度,但又不失去升温后恢复代谢的能力,从而能长期保存胚胎的一种生物技术。目前胚胎保存的方法有三种,分别是常规缓慢保存、一步保存法、玻璃化保存法。而胚胎玻璃化保存的具体操作步骤分为三步,具体如下:
1、脱水处理
首先会把胚胎放到保存保护液里面,对它进行脱水过程也就是皱缩过程,这个过程主要是为了避免后期保存因为含水量太多、液体量太多导致冰晶形成,而对胚胎带来损伤。
胚胎玻璃化保存需要选择4细胞及以上的Ⅰ-Ⅲ级,可利用卵裂期胚胎进行保存,其中Ⅰ级和Ⅱ级胚胎为优质胚胎。保存液在室温下平衡至少30min,将胚胎置于玻璃化保存平衡液中平衡10min,待细胞内水分和保存保护剂充分置换后,转入玻璃化保存液中平衡,1min内移至保存载杆上并迅速投入液氮中保存。
2、装入载杆
囊胚进行脱水皱缩处理以后,需要把含有胚胎的保存保护液放到专门进行胚胎保存的载杆上,基本上每个生殖中心进行囊胚保存处理时都会有这个步骤。
3、放入液氮
将囊胚装载完之后,需要小心谨慎的放到液氮中,也就是-196℃的环境中进行保存,然后将储罐的盖子盖好,并每24小时监测液氮水平,确保保存胚胎不会受温度变化的影响。