泰国三代试管婴儿技术PGD/PGS得到长足的进步,大大提高临床妊娠率、提高优生优育水平,目前泰国医院主流的PGD试管婴儿技术,包括 FISH、CGH(CGH微阵列)、NGS高通量测序、SNP微阵列技术。
泰国三代试管婴儿PGD检测方法有四种,分别是荧光原位杂交技术FISH技术、CGH - 比较基因组杂交技术、新一代测序技术NGS、Snp array全基因组芯片技术。目前大部分的机构已经淘汰了FISH技术,基本都在使用CGH、NGS来进行胚胎筛查,极少部分的高端生殖中心已经开始使用Snp array技术筛查胚胎。
泰国试管婴儿PGD检测方法
荧光原位杂交技术FISH技术
所谓FISH技术是利用附着在染色体一小部分DNA制成DNA探针,使其在显微镜下使用紫外线发光,这些化学物质被称为荧光团,每条染色体都可以使用不同的颜色,这样就可以区分不同的染色体,以此来进行筛查。
FISH技术的缺点:
- 1. 一次不能检测所有染色体异常(常规检测5条)、在单细胞中容易出现split signal导致结果的误判;
- 2. 整个过程依靠技术人员的熟练程度,造成结果不稳定;
- 3. 对于妊娠率的提高没有任何帮助。
CGH - 比较基因组杂交技术
在20世纪90年代早期,开发的一种称为比较基因组杂交(CGH)的方法,用于评估肿瘤中的染色体数目。1996年,这种方法首次被开发并应用于胚胎。CGH允许评估细胞中的每个染色体。这被称为全面的染色体筛查。
CGH方法需要1mg DNA,而单个细胞含有该量的约十亿分之一,因此,为了做CGH,必须首先增加DNA的数量。这个过程叫做扩增,最广泛使用的方法称为聚合酶链式反应(PCR)。
CGH技术的缺陷:
- 1. 检测准确率有待提高;
- 2. 可检测出的染色体问题还是有局限性,有很多染色体问题无法检测出来;
- 3. CGH遗漏了一种染色体问题:当胚胎中的所有染色体都有额外的拷贝时就会发生这种情况;胚胎的多倍体发生,有可能会导致胚胎植入失败或流产。
新一代测序技术NGS
NGS新一代测序技术,是一个功能强大的平台,是用于IVF胚胎的全面染色体检测的新技术,可以同时对数千到数百万个DNA分子进行测序。
使用NGS有一些潜在的优势:
- 1. 降低成本;
- 2. 增强对结构异常的检测,例如缺失或重复片段的染色体;
- 3. 更好的检测胚胎何时可能具有不同结果的细胞的能力(镶嵌性);
- 4. 通过增加自动化的使用减少人为错误。
Snp array全基因组芯片技术
SNP array是一项新的令人振奋的分子遗传学技术,比分析中期染色体的CGH技术、CGH微阵列、FISH技术更为精细的检测胚胎。SNP array能够检测大量的细微DNA改变和/或与染色体拷贝数(非整倍体)或染色体结构重排有关的异常改变。SNP array分析能够对所有的23对染色体都进行分析。能够提供30万个SNP位点的分型信息。
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