干细胞疗法通过不同途径治疗肝硬化

肝脏在各种致病因素持续损伤下反复发生纤维化，正常的肝组织被瘢痕和再生结节所取代，最终形成肝硬化。 肝硬化也是慢性肝病的常见终末期表现，肝移植被认为是肝硬化最有效的治疗方案，但因供体不足、经费较高、免疫排斥等原因，大多数肝硬化患者并未进行肝移植。

近年来多项研究报道了自体骨髓干细胞（BMSC）参与了肝功能的修复和重建，但具体机制并不清楚。自体BMSC抗纤维化作用已在动物模型中得到明确证实。此外，临床试验也表明自体BMSC移植能迅速改善肝功能，且无明显副作用。

干细胞疗法治疗肝硬化机制

BMSC治疗肝硬化的机制目前认为主要有两种：一是功能性肝细胞的增殖和转化，二是通过旁分泌改善微环境。

功能性肝细胞的增殖和转化：BMSC进入肝实质后，在微环境的刺激下一方面可分化为肝脏卵圆细胞，另一方面可直接分化为肝实质细胞、肝星状细胞和肌纤维母细胞。

旁分泌作用：BMSC进入肝脏后，不论是发生细胞分化还是发挥抗肝纤维化作用，都离不开各种细胞因子和炎症介质的参与。这些细胞因子和炎症介质可激活肝祖细胞，从而抑制星状细胞激活并促进其凋亡，抑制损伤部位炎症的相关细胞增殖和迁移等。 目前发现参与旁分泌作用的因子主要有肝细胞生长因子、基质金属蛋白酶、IL-10等。 每种细胞因子和介质的作用各不相同，彼此之间相互协调，共同参与抗纤维化作用。

干细胞疗法治疗肝硬化的临床应用案例

临床上BMSC治疗肝硬化时，细胞输入通道主要包括肝动脉、门静脉、外周静脉、肝内或脾内注射。

肝动脉：肝动脉分为左右两支，血液从腹腔干经肝动脉直接进入肝内。临床上肝动脉由于其重要的解剖原因，主要用于肝脏肿瘤介入治疗的通路。在自体BMSC治疗肝硬化中，肝动脉也可作为细胞注入的通路。

zhao等的一项关于干细胞治疗肝病的荟萃分析结果显示，经肝动脉输注干细胞更利于患者肝功能的改善。Laio等在应用BMSC治疗肝硬化的临床试验中，选择经肝动脉输注干细胞，结果显示干细胞治疗组的患者在治疗后12周血清Alb、TBil等多项指标得到明显改善。

门静脉：门静脉是肝门重要的脉管结构，胃肠道血液回流至肠系膜上静脉后汇入门静脉内。 在超声引导下穿刺门静脉，可直接注入干细胞，而且避开了肺部循环。

Salama等在研究中对90例肝硬化患者进行超声引导下经门静脉注入干细胞，术后患者未发生肝门部胆管损伤、出血等并发症。试验结果表明门静脉输注BMSC后能明显改善肝硬化患肝功能。

外周静脉：外周静脉是临床治疗时应用最为广泛的输注通道，其操作简单方便，普通病房即可完成，且并发症少。 因此外周静脉也可以作为BMSC输注通路之一。

王等人在进行一项自体BMSC治疗肝硬化的随机对照研究中，试验组患者均通过肘部静脉输注自体BMSC，结果表明经外周静脉输注BMSC后可以一定程度改善患者肝功能。

肝内或脾内注射：除了上述通路外，也有学者提出将干细胞直接注入肝脏或脾脏内。 国内外已有动物实验表明直接经脾脏或肝脏注射干细胞可以改善肝功能。

Amer等在一项40人参与的病例对照研究中，试验组20人予以BMSC治疗，其中10人经脾脏内注射干细胞，其余10人则行肝内注射。结果显示经两种途径治疗后，肝硬化患者Alb和终末期肝病模型（MELD）评分得到了明显改善。作者指出两种途径在上并无差异，但经脾脏注射操作更加方便。

评估指标：对于干细胞治疗肝硬化评估，需要多项指标综合判断，其中以肝功能和凝血功能相关指标应用最为广泛。 肝功能指标主要包括ALT、AST、TBil、Alb、MELD评分、Child-Pugh评分等。 凝血功能指标主要包括凝血酶原活动度（ＰＴＡ）、凝血酶原浓度（ＰＣ）、凝血酶原时间（ＰＴ） 和国际标准化比值（ ＩＮＲ）。

Sama等在BMSC治疗后随访中观察了肝硬化患者Alb、ALT、AST、TBil、PC的变化，结果表明在治疗后第12周，所有指标均得到明显改善。

除上述指标外，临床上也有学者选择肝纤谱、肝脏体积、脾脏体积、肝脏储备功能、血常规、功能状态评分、疲劳量表、炎症因子等作为评估指标。

Amer等在研究中向终末期肝病患者输注骨髓来源的肝样细胞，治疗后８周随访发现，经干细胞治疗的肝病患者MELD评分、Child－Pugh评分、功能状态评分和疲劳量表得到明显改善。

干细胞移植疗法让肝硬化变得“柔软”‍

总结及展望

自体BMSC在治疗肝硬化上取得了一定成果。 同脐带干细胞、肝干细胞相比，自体BMSC方便获取、体外易培养扩增、 无免疫排斥，可作为肝移植的替代疗法。能缓解临床症状，提高生存率！