干细胞移植治疗肝硬化临床研究

有一种肝病

虽然名字里不带癌

但论危害程度一点也不比肝癌差

这种肝病就是肝硬化

病毒性肝炎以及长期大量酗酒是引起肝硬化的最主要原因。其中慢性丙型肝炎病毒感染和酗酒是西方国家最常见的病因，而我国肝硬化最常见的原因则是慢性乙肝肝炎病毒感染。

据统计，乙肝新增病例占病毒性肝炎的比例由2004年的79％，上升至2008年的83％。此外尚有广泛的乙肝病毒携带者，而大部分乙肝病人将逐渐发展为肝硬化。失代偿期肝硬化所出现的上消化道大出血、腹腔积液、肝性脑病等严重并发症给我国医疗领域带来了巨大挑战。

失代偿期肝硬化的病理基础

肝硬化的病理过程以弥漫性结节状再生取代正常肝脏结构为特征，同时伴有致密纤维间隔的产生、伴随的实质硬变和肝组织的最终崩解。肝细胞呈弥漫性变性、坏死、凋亡，残存细胞再生，形成再生结节，结缔组织弥漫性增生形成纤维隔，最终分割及破坏正常肝小叶结构，代之以硬化性结节或假小叶为特征的病理性改变。

最终，器官的原始结构完全丧失，伴随而来的是肝血管和肝内毛细胆管结构的严重扭曲。肝脏逐渐变形、变硬而发展为肝硬化。

早期由于肝脏代偿功能较强可无明显症状，后期则以肝功能损害和门脉高压为主要表现，并有多系统受累，晚期常出现上消化道出血、肝性脑病、继发感染、脾功能亢进、腹水、癌变等并发症。

肝脏疾病进展周期

目前失代偿期肝硬化的临床治疗方案

保护肝细胞，治疗肝硬化的并发症，只能可最大程度上延缓患者病情的发展。原位肝移植，是治疗终末期肝病及其包括早期肝细胞癌在内的部分病例的最根本、最有效的治疗手段。但是供肝来源的严重短缺和昂贵的医疗费用，限制了肝移植的普及开展。

干细胞移植治疗肝硬化

近年来，大量的研究和临床试验表明，干细胞移植是治疗终末期肝病一种有效的、 桥接治疗手段，它能为等待施行肝移植或急性肝功能衰竭的患者争取到更多的时间，甚至为自身肝脏的修复与再生提供机会。因此干细胞移植为众多肝硬化等终末期肝病的患者带来新的希望。

间充质干细胞是一种来源于中胚层具有多向分化潜能的干细胞，广泛存在于骨髓、脐带、脐血、外周血甚至脂肪中。相对而言，脐血间充质干细胞具有来源丰富、低免疫源性、创伤性小、操作简单等优点，甚至脐血干细胞具有的旁分泌功能可以加速肝细胞的活化，使得干细胞移植技术在肝脏疾病治疗中得到广泛应用。

干细胞治疗失代偿期肝硬化的作用原理

脐带血是间充质干细胞(MSCs)采集的重要来源，也是较容易获得的一种采集方式，相对于其他采集方式，具有更低的抗原活性、更强的增殖能力、 更高的产出率、易应用于临床治疗等优点。

脐带间充质干细胞在许多临床研究中都被报道可以延缓肝纤维化的进展。移植hUC-MSCs可能通过多种机制影响肝功能。

首先，间充质干细胞可在肝内向肝细胞样分化，hUC-MSCs可在肝内沿肝细胞谱系分化成全新的肝细胞，因此可替代病变肝脏中凋亡及硬化坏死的肝细胞。

其次，间充质干细胞具有一定的免疫调节功能，hUC-MSCs可以在肝内被编程定向分化。肝内免疫细胞就是肝内产生的组织特异性因子，或是由相邻细胞融合后的遗传物质组合而成，因此，hUC-MSCs可在肝内分化增殖调节免疫能力。

移植的间充质干细胞也被证明具有其他的细胞因子作用，例如，抗炎作用、分泌营养因子、抗肝细胞纤维化活性，抗氧化活性、限制病变组织的凋亡、促进肝组织血管化；这些因素都有助于损伤的肝细胞再生。

此外，脐血间充质干细胞释放的肝细胞生长因子(HGF) 还参与了抗体中和诱导细胞凋亡的作用。证实脐血间充质干细胞通过旁分泌机制调节活化肝细胞的功能，这也为hUC-MSCs在肝脏炎症和纤维化中的保护作用做出了合理的解释。

以上研究表明，脐带间充质干细胞有促进肝脏再生、改善肝硬化患者肝功能的作用。但一次细胞移植能否获得好的？多次移植是否会增加癌化风险和减少其它并发症的发生等问题，尚缺乏临床对照研究。

研究人员通过分离、培养、扩增脐带间充质干细胞单次移植与多次移植治疗肝硬化患者，探讨了其对乙型肝炎肝硬化患者临床症状和肝功能的影响，评价了其和安全性。

临床案例研究

目的：探讨多次进行人脐带间充质干细胞（HUC-MSCs）肝内移植治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化患者的临床。

方法：在60例乙型肝炎肝硬化患者中，接受单次脐带间充质干细胞肝内移植治疗20例，接受多次细胞移植治疗20例，另20例对照组接受常规内科治疗。在DSA下，经股动脉插管至肝固有动脉或在超声引导下行肝内门静脉穿刺，注入脐带间充质干细胞约4×108个，行细胞移植治疗1~3次，随访36个月。

三组肝功能指标变化的比较

治疗前，三组血清TBIL、ALB、INR和Child-Pugh评分比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；在随访12个月和24个月时，单次移植组血清ALB水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；在随访36个月结束时，多次移植组血清TBIL、ALB、INR和Child-Pugh评分与单次移植组和对照组比，均有显著统计学差异。

各组肝、脾脏大小比较

入组前，三组患者肝脏最大平扫面积、脾脏长度和厚度比较，无统计学差异（P＞0.05）；在随访36月结束时，多次接受细胞移植患者肝脏最大平扫面积较对照组显著增大、脾脏长度和厚度较对照组显著缩小，差异有统计学意义。

三组并发症发生率比较

讨论

本研究进一步分析比较了单次和多次脐带间充质干细胞移植治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化患者，结果显示在随访12个月时，多次移植组肝功能改善程度显著优于单次移植组。在随访24个月和36个月时，接受多次脐带间充质干细胞移植患者肝功能指标进一步改善，提示一次细胞移植不能巩固，而往往需要多次行细胞移植治疗。

三组患者均有肝癌和肝衰竭发生，但发生率比较无统计学差异，说明三组患者原发性肝癌和肝衰竭的发生与脐带间充质干细胞移植无显著相关，为与其疾病的演变过程有关。我们认为，脐带间充质干细胞肝内移植不会增加发生肿瘤的风险。接受多次细胞移植患者腹水发生率低，血清白蛋白上升，肝功能指标稳定。

结论：多次接受脐带间充质干细胞移植可有效改善失代偿期乙型肝炎肝硬化患者肝功能，安全性可行，其长期还有待观察。

综上所述，脐血间充质干细胞移植的发展及推广无疑是为肝硬化的患者带来的新的希望。