脐带间充质干细胞移植治疗神经系统变性疾病

神经系统变性病是一组进行性变性疾病，主要以损害中枢神经系统为主，临床上以肌无力障碍、运动障碍和锥体束征受损为特征，多无感觉障碍。一般从发病开始，患者生存期一般只有3-5年。近年来对神经系统变性病的发病机制认识不断深刻，以及对干细胞修复损伤神经功能研究不断深入的基础上，脐带间充质干细胞移植治疗神经系统变性病，有了不错的。该项临床实验是在解放军323医院细胞治疗中心完成的。

纳入对象：1、脊髓小脑共济失调患者均表现出共济失调、构音障碍、锥体束征等典型症状；头颅mri检查提示小脑、脑干萎缩。2、肌萎缩性脊髓侧索硬化症患者均符合1994年西班牙el Escorial会议的确诊标准。3、延髓脊髓性肌萎缩患者表现为面、舌肌萎缩，下咽困难、构音障碍及近端肌肉萎缩、肢体无力，无上运动神经元征，肌电图呈神经元性损害改变。4、原发性侧索硬化表现为痉挛性截瘫，高肌张力、腱反射亢进，锥体束征阳性，下运动神经元无受累迹象。

排除标准：累及小脑、脑干的变性疾病。入选神经系统变性病患者21例，男性11例，女性10例，年龄在15-72岁，平均年龄48.5岁。1、脊髓小脑共济失调6例，1例进行遗传学检查，明确为harding分类中的SCA3型；采用共济失调评分表，1例为轻度、3例为中度、2例为重度共济失调。2、运动神经元病15例，其中肌萎缩性侧索硬化症12例，延髓脊髓性肌萎缩2例，原发性侧索硬化症1例。15例患者肌电图检查，其中14例运动单元电位时限增宽、运动单元数量减少93.3%，12例波幅增高80%，4例出现巨大电位26.7%。

脐带间充质干细胞制备：脐带剪碎后经0.1%胶原酶和0.125%的胰酶消化，滤网过滤去除未消化的组织，过滤后的细胞接种于培养瓶，加入培养液后置37℃、体积为5%的CO2培养箱培养。四五天后换液，弃非贴壁细胞，以后每3d或4d半量换液。待细胞80%融合，0.25%胰酶消化，按10000/cm²传代。将传代培养的铁壁细胞制成20ml袋的细胞液，细胞数量大于1000万。

治疗方法：在取得专家论证和患者及其家属的同意下，对该组21例神经系统变性病患者进行干细胞治疗。将分选的合格干细胞（大约为1000万单位）经腰穿注射到患者蛛网膜下腔，部分静脉注射；其余分别保存到零下℃储存，每次使用是复苏1管，并以生理盐水制成4ml干细胞液，锥虫蓝测定细胞活率为96%，再经腰穿注射到患者蛛网膜下腔。静脉回输4000万单位细胞量，每两周注射1次，4次为一个疗程。每次治疗时给予地塞米松5mg静脉注射，防止静脉输注脐带间充质干细胞引起的排异反应。

评分标准：所有患者入院时及干细胞治疗后3个月进行评分，对共济失调组由19项内容进行评定，评定稳定性、协调性、构音和眼球运动四方面的功能。0分为正常，分值越高共济失调越严重，最高评分100分。0-20分为轻度共济失调；20-50分为中等程度；50-70分为重度；大于70分为特重，生活完全无法自理。

肌萎缩性脊髓侧索硬化症功能分级量表由10项内容组成，4项观察延髓和呼吸功能，2项观察上肢功能，2项观察下肢功能，2项观察其他能力。

同时肌萎缩性脊髓侧索硬化症患者自我评估问卷由身体运动能力、生活自理能力、饮食能力、社会交往能力、情绪反应5个方面的内容组成。

安全性评估：每次随访记录患者干细胞治疗后的不良反应，定期检查血常规、尿常规、肝肾功能、心电图、x射线胸片、血压等指标以观察其不良反应及其转归情况。

结果统计：对21例患者进行3-24个月的随访，结果显示：运动神经元病组15例，进步8例（53%），显效4例（27%），无效3例（20%），总有效率为80%；脊髓小脑共济失调组6例，进步3例（50%），显效1例（17%），无效2例（33%），总有效率为77%。

安全性：21例中有轻度低颅压性头痛（腰穿后），给予静脉输注生理盐水500ml后患者症状消失，有2例在治疗后2h出现发热，体温37.8-38.2℃，嘱患者多饮水，4h后体温恢复正常，其余患者治疗后未见明显不良反应。

本组患者安全性评估表明，异体脐带间充质干细胞在神经损伤中的治疗安全可行，脐带间充质干细胞具有低免疫原性，治疗时无需配型，且无排斥反应，来源方便。